从安全剂被发现以来，人们对安全剂的作用机理进行了越来越深入的研究。对不同除草剂的安全剂作用机理进行比较，发现它们的作用机理不完全相同。目前，安全剂增强作物对除草剂耐性的作用机制尚无定论，其作用机制可能有：1. 安全剂对作物吸收或传导的影响。安全剂可能通过降低除草剂的吸收或传导发挥解毒作用，同时某些除草剂及其安全剂的结构相似性将会导致它们在活性吸收位点处的竞争；2. 安全剂对除草剂作用靶标的影响；3. 安全剂对除草剂代谢的影响；4. 其它作用。水解反应对某些除草剂的活化作用和解毒作用十分重要。
尽管安全剂作用机制的研究在过去几十年来引起了人们的广泛关注，但确定的作用机制仍未阐明。除草剂安全剂并非专一地采用某一种作用机制，而是体现出采用是一系列过程相结合来实现解毒作用的。
