要想从小麦叶片中提取蛋白质怎样进行预处理

小编:优质农业网   人气:0℃   发布时间:2025-02-17 17:59:53
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植物叶蛋白的提取主要有盐析法、有机溶剂沉淀法、加热法(含逐步和快速加热)、

要想从小麦叶片中提取蛋白质怎样进行预处理

离心分离法、结晶和重结晶法等。依据今后的开发方向(以饲料为基础,以食品、饮品为开发方向)及简便易行和使用的原则,主要采用盐析法、加热法和有机溶剂法分离提取叶蛋白(冷提和热提)。不同的提取方法,对样品的处理方式、程度和要求不同,结果也有差异。

(一)(NH4)2SO4

沉淀法提取叶蛋白

取0.3g

植物叶蛋白,用液氮充分研磨转入离心管中,加入3mL

提取缓冲液,摇匀并放在4℃条件下提取1h,充分溶解蛋白后,4℃10000r/min

离心20min,弃沉淀,上清液中加入(NH4)2SO4

,混匀1h,按1:2(v/v)加入-20℃预冷的80%丙酮,混匀后4℃12000r/min

离心10min,沉淀在-20℃冰箱中放置20min,使丙酮完全挥发后加适量上样缓冲液,待沉淀充分溶解后,4℃12000r/min

离心5min,取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。

(二)改良丙酮沉淀法提取叶蛋白

取0.3g

左右的植物叶片,用液氮研磨,色素多的可按材料鲜重的10%加入PVP,并将充分研磨过的样品转入离心管中,加入4mL

的提取缓冲液,摇匀并放在4℃条件下提取1h,充分溶解蛋白。放置后的样品充分摇匀,4℃10000r/min

离心30min,弃沉淀,上清液中加入2.5~3倍体积的村-20℃条件下过夜,让蛋白充分沉淀。之后,4℃10000r/min

离心30min,其上清,沉淀置于-20℃下,使丙酮完全挥发,如有必要加入上样缓冲液溶解沉淀。缓冲液用量300ul,沉淀充分溶解后,转移至1.5mL

离心管中,4℃12000r/min

离心15min

,取上清液即为所提取的叶蛋白溶液。

该方法提取的蛋白质,提取效率高,杂质干扰少,电泳结果蛋白条带清晰,数量多。

(三)植物叶片总蛋白的提取—三氯醋酸—丙酮沉淀法

①在液氮中研磨适量的叶片;

②悬浮于含10%的三氯醋酸和含0.07%β-巯基乙醇(可用DTT

代替)的丙酮溶液在-20℃条件下冰浴;

③让蛋白质沉淀过夜后离心(4℃

10000r/min

离心30~60min),弃上清;

④重悬沉淀浮于含0.07%β-巯基乙醇的预冷丙酮溶液中;

⑤离心(同上)后真空干燥沉淀;

⑥用上样缓冲液溶解沉淀,离心;

⑦Brandford

法定量蛋白,然后分装至Eppendof

管中保存在-78℃备用。

(四)分步提取可溶性叶蛋白

(1)蛋白质浸出

①水溶性蛋白质浸出:用0.05molpH7.0的磷酸缓冲液(或蒸馏水)将样品制成匀浆液,然后离心15min(4000r/min),收集上清液即蛋白质浸出液,再将沉淀物按上述操作重复两次。②盐溶性蛋白质浸出用10%NaCl

将前者剩余沉淀物分离提取两次,收集蛋白质浸出液。

(2)蛋白质沉淀用0.1mol

醋酸将蛋白质浸出液pH

值调至蛋白质等电点(pH4.5左右),即8体积蛋白质浸出液加入1体积0.1mol

醋酸,混匀,离心15min(3000r/min),弃去上清液,沉淀物即为可溶性叶蛋白。

(3)蛋白质收集于沉淀物中加入95%乙醇,混匀,用定量滤纸过滤或抽滤,待风干后收集。

摘要:说起素食,很多人会担心蛋白质是否够,以及素食是否能提供“完全蛋白质”。植物蛋白的食物有哪些?下面小编就来11种富含蛋白质的植物性食物,同时还较详细的列出了这些食物,除蛋白质以外的营养要素及对身体的好处。植物蛋白食物植物蛋白的食物有哪些那些富含植物蛋白的食物

1、南瓜子

如果你和我一样锺意南瓜,特别是在秋天,上次你蒸了一些南瓜,你的种子怎么处理了?一盎司南瓜子含有9.35克的蛋白质!比同等数量的绞细牛肉还多两克。高蛋白质使南瓜成为任何沙拉和点心的绝佳伴侣。

南瓜子给身体带来的好处:

色氨酸:抑制忧郁(转化成血清素和烟酸)

谷氨酸(需要创建GABA):减轻压力,有助于缓解焦虑和其他相关的情况。

锌:提高免疫系统的功能,避免骨质酥松。

植物甾醇:降低低密度脂蛋白胆固醇(坏的胆固醇)和提高高密度脂蛋白胆固醇(好的胆固醇);也可以有效地预防癌症。

南瓜子还富含锰、磷、铜、维他命K、维他命E、B族维生素如硫胺素、核黄素、烟酸、泛酸、维生素B-6(?哆醇)、叶酸、钾、钙、铁、镁、锌、硒等等!

如果南瓜子不是你的菜,也不要担心,还有很多富含蛋白质的种子可以选择。

2、芦笋

烧烤芦笋加上一丝丝香醋就足以让我流口水了。这种有八嫩芽的美味素蔬菜含有3.08克蛋白质,对于这么细长弱小的植物来说相当了不起了。

芦笋对于健康的好处:

维生素K:芦笋是维生素K的头号植物性来源,能预防骨质疏松和骨关节炎。

维生素A和叶酸:抗衰老、抗炎、确保心脏健康,预防出生缺陷。

利尿剂:减少水储留。

催欲剂:噢!啦!啦!

芦笋也含有丰富的钾、谷胱甘?、维生素C、抗氧化剂(谷氨酸、甘氨酸、半胱氨酸)等等。

3、白花菜

很多年来我都不是白花菜的狂热崇拜者。我一直以为一个白色蔬菜能有多健康?但是自从我开始_解白花菜的好处及所有十字花科植物的成员,我开始对这种蔬菜刮目相看。一杯煮熟的白花菜=2.28克蛋白质和大量能减少患心血管疾病和癌症的营养。

白花菜对于健康的好处:

类胡萝卜素(β-胡萝卜素和植物营养素):包括山柰酚、阿魏酸、肉桂酸、咖啡酸。这些营养素有助于保护你的身体免受自由基损伤。

萝卜硫素:作为抗癌媒的强有力指示体。

ω-3脂肪酸:减少炎症。

白花菜也是维生素C、锰、硫代葡萄糖甘(glucoraphin)、维生素B1(硫胺素)、B2(核黄素),B3(烟酸)、B5(泛酸)、维生素B6(口比哆醇)和B9(叶酸),磷和钾、引朵3甲醇(强对抗癌症的迹象)等等很好的一种来源。

4、花生

如果你是在美国长大,你可能吃过花生酱和果冻三明治,但我怀疑你是否知道这种小吃到底有多健康。一盎司(约28克干烤无盐花生)=6.71克的蛋白质。

花生的好处:

辅(酉每)Q10:在低氧环境下保护心脏。

白藜芦醇:生物类黄酮,被认为能改善大脑的血流量和降低低密度脂蛋白胆固醇。

烟硷酸:协助复苏的细胞损伤,预防阿尔茨海默病和与年龄相关的认知问题。

花生也是钙、铁、核黄素、烟硷酸、泛酸、维生素b1、维生素b6、叶酸、铜、锰、钾、钙、铁、镁、锌、硒、维生素E、抗氧化剂(多酚p香豆酸)等物质的很好的来源。

5、燕麦片

燕麦因为多年来提供给小孤儿奥利弗或旧学校的囚犯作为早饭而有一个坏名声,事实上它的营养足以成为国王才能享用的食物。一个煮杯含有高达6.08克的蛋白质并且是纤维的重要来源,有助于稳定血糖水准。我喜欢在早上用一点香蕉和肉桂混合在一起---嗯,太美味了!

燕麦片的好处:

硒(抗氧化剂结合维生素E):增强免疫力和提升心情,以及抗癌媒的强有力指示体。

减肥:保持血糖水准。高水准的纤维使你长时间有饱食感。

镁:协助能量的产生,保持强健骨骼,并且可能缓解经前综合症。

磷:协助保持骨骼健康,增加产能和有助于一个健康的消化系统。

燕麦片也是色氨酸、铁、钙、维生素B如硫胺素、核黄素、烟酸、维生素E、锌、铜、铁、锰、镁和等等元素的来源。

6、绿豆芽

你可能在炒豆子(已经发芽了)或者新鲜豆子中看见过这种小豆芽了,但这么多年来它并没有得到多少荣誉。大多数豆类中富含蛋白质和水溶性纤维,_管绿豆芽没有排到豆蛋白含量排行榜的最前面,但一杯含有3.16克蛋白质,且低热量高营养的特点使其表现出色。

绿豆芽的益处:

卵磷脂:降低血液中的胆固醇含量,降低肝脂肪。

锌:随着蛋白质和其他维生素在绿豆中共同作用,锌有助于增强你的指甲。

植物雌激素:含有许多针对肌肤的抗衰老成分。这些植物雌激素作用于在皮肤中发现的雌激素受体,刺激合成透明质酸、胶原蛋白和弹性蛋白,这些都是构成皮肤必不可少的成分。

绿豆芽也富含维生素A、B族维生素、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、叶酸、铁、钾、钙、磷、镁、锌等等。

7、杏仁

大致上在任何时候杏仁都算得上是一个美妙的零食,无论从其蛋白质含量还是营养密度来看。当谈到营养密度不得不提杏仁的顶部螺母链,他们会使你长时间产生饱腹的感觉。一盎司(约24克果仁)含有6.03克的蛋白质,它们也是任何点心或者大餐的绝佳搭配。

杏仁有益于健康的原因:

苯丙氨酸:帮助实现认知功能的健全。

营养丰富:使你长时间饱腹,可以帮助减肥。

维生素E/镁:对于心脏和肌肉健康非常重要。

杏仁也富含钙、磷、铁、镁、锌、硒、铜、烟酸、锰、核黄素、叶酸等等。

8、菠菜

我们都知道菠菜是一种特殊的绿叶菜。从大力水手到高级餐厅的昂贵沙拉中,菠菜都扮演了一个重要的角色。1杯煮熟的菠菜=5.35克的蛋白质。它富含类黄酮(一种含有抗癌特性的物质)。菠菜对你的皮肤、眼睛、大脑和你的骨头都是很好的!

菠菜的好处:

新黄质和黄质:抗炎epoxyxanthophylls(一种独特的抗癌类胡萝卜素)。

叶黄素和玉米黄质:保护眼睛,预防白内障及老年性黄斑变性。

维生素K:确保有健康的神经系统和大脑功能,骨骼健康(一满杯的菠菜含有1000%的RDA的维生素K)

维生素A:加强免疫力和促进皮肤新陈代谢。

菠菜的维生素C和其他抗氧化剂、类黄酮、β-胡萝卜素、锰、锌、硒等含量丰富。

9、花椰菜(西兰花)

花椰菜(西兰花)和白花菜在碳水化合物组成上面有着惊人的相似,也是基于这样的事实,即他们都是在十字花科植物的家庭成员。当我还是一个孩子的时候,我记得我喜欢花椰菜(西兰花)只是因为被掰成一块一块的花椰菜(西兰花)看起来像是细小的树木。现在,作为一个成年人,我喜欢他们的令人印象深刻的营养成分,和他们看起来像小树木的样子。一杯切碎的西兰花=5.7克蛋白质和如孩童般的享受。

花椰菜(西兰花)的好处:

硫代葡萄糖甘(身体处理成萝卜硫素):帮助肌肤排毒和自我修复,以及去除体内能增加胃癌的风险的幽门螺杆菌。

β-胡萝卜素、锌和硒:所有的工作都是为了加强免疫系统。

引朵3甲醇:一种强大的抗氧化剂和抗致癌物质,可能阻碍乳腺癌、_颈癌和前列腺癌的增长以及提高肝功能。

花椰菜(西兰花)也是叶酸、维生素C、钙(事实上大多数是乳制品)、叶黄素和玉米黄素、B6、叶酸等等的一个好来源。

10、藜麦

在我前面所有列表所提的植物都不足以与藜麦的潜力相比。就其本身而言,它含有完美的蛋白质,可谓谷物之王。每单位含有16%的蛋白质是所有比例最高的!这意味着,四分之一杯(干)的藜麦已经含有6克*的蛋白质。如果你_这种谷物与几根芦笋和一朵美丽的白花菜搭配,加上花椰菜和发芽的绿豆一起炒,你_在简单的一餐饭中就享受30克甚至更多蛋白质。

藜麦的好处:

镁:放松肌肉和血管,它可以帮助调节血压。

锰和铜:都可以作为抗氧化剂,保护人体免受自由基的侵害。

木酚素:一种可以降低患心脏病以及某些类型的癌症风险的植物营养素。

藜麦同时也富含铁、钙、钾、锌、维生素E、硒、锰、铜、磷和色氨酸等等。

11、豆类

豆类有很多,其中黄豆(大豆)是豆类中高蛋白质的代表。下面就以大豆进行讲解。

大豆在豆类作物中蛋白质含量居首位,其中含有人体所必需的各种氨基酸,还有维生素A、B、C和D,并富含可食用的油脂,故为重要的蛋白质和油料作物。大豆的种子含蛋白质36~42%,油脂16~20%。用大豆制成的豆腐、豆芽和酱油是中国极普遍的副食品。豆油除供食用外,可制油漆、肥皂、甘油、润滑油,还可制人造羊毛,又为医药原料。大豆叶含蛋白质12~20%,与榨油后的麸饼均为优质饲料和肥料。

大豆的好处:

1、减轻女性更年期综合征症状;

2、防止血管硬化;

3、让头脑聪明;

4、降糖、降脂;

6、美白护肤;

7、预防癌症;

8、降低血脂;

9、增强机体免疫功能。

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