将新鲜菠菜（Spinacia）叶片洗净擦干，去叶柄及叶脉。称取样品 8g，剪碎置研钵内，加入 8cm3丙酮及少许固体碳酸钠，迅速研磨成匀浆；然后再加入 20cm3丙酮充分研磨。
在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉，将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有 20cm3石油醚的分液漏斗中，再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵，合并滤液。
沿分液漏斗的壁小心加入 40cm3蒸镏水，轻轻摇动，使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟，待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层。如发生乳化现象可加入 2－3cm3饱和NaCl 溶液。
在分液漏中再加入 40cm3蒸镏水，轻轻摇动，以洗去石油醚中残留的丙酮，共洗两次。然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中，置暗处或用黑纸包好备用。
