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问题描述:
有知道中华人民共和国国家标准《水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法》全部内容的吗，小弟新人，没有积分，还望诸位大侠不吝赐教，多谢了
解析:
1 适用范围
本标准适用于水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉含量的测定。
2 参考标准
GB5006—85《谷物籽粒粗淀粉测定法》
GB3523—83《谷类、油料作物种子水分测定法》
3 测定原理
淀粉与碘形成碘—淀粉复合物，并具有特殊的颜色反应。支链淀粉与碘生成棕红色
复合物，直链淀粉与碘生成深蓝色复合物。在淀粉总量不变条件下，将这两种淀粉分散
液按不同比例混合，在一定的波长和酸度条件下与碘作用，生成由紫红到深蓝一系列颜
色，代表其不同直链淀粉与支链淀粉含量比例，根据吸光度与直链淀粉浓度呈线性关
系，可用分光光度计测定。
4 仪器、设备
4.1 粉碎机（实验室用旋风磨）。
4.2 分光光度计：721型或具有相同性能的其他型号。
4.3 分析天平：感量 0.0001g。
4.4 玻璃仪器：50ml具塞刻度试管，100ml容量瓶。
5 试剂配制
除注明者外均为分析纯，水为蒸馏水。
5.1 氢氧化钠（GB629—81），lmol.L-1、0.09mol，L-1水溶液，准确标定。
5.2 冰乙酸（GB676—78），1mol L-1水溶液，准确标定。
5.3 碘贮备溶液及碘试剂：称 2g碘和 20g碘化钾（GB1272—77）用蒸馏水溶解并稀释
至 100ml，即为碘贮备液。取 10ml碘贮备液稀释至 100ml，即为碘试剂。
5.4 马铃薯直链淀粉标准溶液：1mg/ml，取烘干（55-56℃ 真空干燥）的马铃薯直链
淀粉纯品，称取重量相当于含 0.1000g淀粉，放入 100ml容量瓶中，加入 1ml无水乙醇
湿润样品，再加 9mlmol·L-1氢氧化钠溶液，于沸水浴分散 10min，迅速冷却后，用水定
容。
5.5 支链淀粉标准溶液：1mg/ml，选择与待测谷物样品相应的蜡质谷物标准品，称取
重量相当于含 0.1000g粗淀粉，放入 100ml容量瓶中，加 1ml无水乙醇，再加 9ml1mol·
L-1氢氧化钠溶液，于沸水浴加热 10min，迅速冷却后，用水定容。
5.6 石油醚（HG3—1003—76），沸程 60-90 。
6 样品的选取和制备
6.1 将样品挑选干净（谷子脱壳、稻谷制成精米），按四分法取样 20g。
6.2 用粉碎机将样品粉碎，全部通过 0 177mm孔径筛（80号），混匀装入磨口瓶备用。
7 测定步骤
7.1 混合校准曲线绘制
取 6个 100ml容量瓶，分别加入 1mg/ml马铃薯直链淀粉标准溶液 0、0.25、0.50、
1.00、1.50、2.00ml，再依次加入1mg/ml支链淀粉标准溶液 5、4.75、4.50、4.00、
3.50、3.00ml，总量为 5ml。另取 1个 100ml容量瓶，加入 0.09mo1.L-1氢氧化钠溶液
5ml作空白。然后于各瓶中依次加入约 50ml水、1ml1mol·L-1乙酸及 1ml碘试剂。用水
定容后显色 10min，在 620nm处读取吸光度。
以直链淀粉毫克数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制校准曲线或建立回归方程。
7.2 样品测定
7.2.1 按 GB5006—85《谷物籽粒粗淀粉测定法》和 GB3523—83《谷类、油料作物种
子水分测定法》测定样品的粗淀粉含量和水分。
7.2.2 样品分散：称取相当于 0.1000g粗淀粉的样品（如按样品干重计算直链淀粉百分
含量时，称取样品 100mg）于 100ml容量瓶中，加 1ml无水乙醇，充分湿润样品，再加
入 9ml1mol.L-1氢氧化钠溶液，于沸水浴中分散 10min，迅速冷却，用水定容。
7.2.3 脱脂：取 20ml分散液于 50ml具塞刻度试管中，加入 7-10ml石油醚，间歇摇动
10min，静止 15min，分层后用连接在水泵上的吸管抽吸，吸去上部石油醚层。重复以上
操作 2-5次（精米脱脂二次，玉米、谷子须脱脂三次）。
7.2.4 测定：吸取脱脂后的碱分散液 5.00ml于 100ml容量瓶中，加水 50ml，再加入
lmol L-1乙酸溶液 1ml及碘试剂 1ml，用水定容。显色 10min后，在 620nm处读取吸光
度。
注：测定样品与绘制校准曲线时的温度相差不能超过 1 。
8 结果计算
8.1 计算公式
a.直链淀粉（%，占淀粉总量）按式（1）计算：
G×100
直链淀粉（%，占淀粉总量） =-------×100…………………………………（1）
m1×5
b.直链淀粉（%，占样品干重）按式（2）计算：
G×100
直链淀粉（%，占样品干重） = -----------------×100………………………（2）
m2× 5× （1-H）
式中： G——从相应的混合校准曲线或回归方程求出的直链淀粉质量，mg；
m1——称取样品中所含粗淀粉的质量，100mg；
m2——称取样品的质量，100mg；
H——水分百分率。
8.2 结果表示
两个平行测定的结果，用算术平均值表示。保留小数点后两位。第三位数的舍入见
GB1.1—81《标准化工作导则 编写标准的一般规定》附录 C。
8.3 结果的允许误差
两个平行测定值的相对误差，不得超过 2%。
附 录 A
马铃薯直链淀粉纯品制备方法
（参考件）
A.1 仪器、设备
A.1.1 离心机（4000r/min）。
A.1.2 电动搅拌器。
A.1.3 冰箱。
A.1.4 真空干燥箱。
A.1.5 磁力搅拌器。
A.1.6 232型甘汞电极或具有相同性能的其他型号。
A.1.7 213型铂电极或具有相同性能的其他型号。
A.1.8 0-1.000V毫伏表。
A.2 试剂
除注明者外，均为分析纯，水为蒸馏水。
A.2.1 氢氧化钠（GB629—81），0.5mol·L-1水溶液。
A.2.2 盐酸（GB622—77），1mol.L-1、1.5mol.L-1、2mol.L-1水溶液。
A.2.3 正丁醇（HG3—1012—76）。
A.2.4 异戊醇（HG3—996—76）。
A.2.5 碘酸钾标准溶液：称取 0.1784g碘酸钾（GB651—77，优级纯）用水溶解后，转
入 1000ml容量瓶中用水定容，即 8.34×10-4mo1.L-1。
A.2.6 碘化钾溶液：称取66.40g碘化钾（GB1272—77）用水稀释至1000ml，即0.4moL-1。
A.3 制备方法
称取马铃薯淀粉 10g，加少量无水乙醇使样品湿润，再加入 350m10.5mol.L-1氢氧化
钠，放入沸水浴加热搅拌 20min至完全分散，冷却，以 4000r/min离心 20min，取上清液
用 1.5moI·L-1盐酸调至 pH6.5（用 pH精密试纸），然后加入 1.1（ V/V）丁醇 -异戊醇
80ml，在沸水浴中加热搅拌 10min，冷却至室温。移入冰箱内（2-4 ）静置 24h去掉上层
污物层，以 4000r/min离心 15min，弃掉上清液，沉淀物即为粗直链淀粉。
用饱和正丁醇水溶液洗涤沉淀物（粗直链淀粉），4000r/min离心 15min，将沉淀物
转入 200ml饱和正丁醇水溶液中，在沸水浴中加热溶解（10-15min），冷却至室温，放
入冰箱内（2-4 ）24h，弃去上层污物层，以 4000r/min离心 15min，沉淀物再加 200ml
饱和正丁醇水溶液加热溶解，反复纯化三次。最后沉淀物用无水乙醇反复洗涤离心 3-
4次，在真空干燥箱中（55-56 ）干燥。即得直链淀粉纯品。
A.4 纯品质量鉴定
A.4.1 淀粉含量测定
称 0.1000g纯品加入 10m10.5mol·L-1氢氧化钠在沸水浴中加热分散，再加入21.5ml2mol
·L-1盐酸，在沸水浴回流水解 2h，用费林氏液法（GB5513—85《粮食、油料检验 还
原糖和非还原糖测定法》）测定还原糖，乘以 0.9即得淀粉量，计算纯品含量。
A.4.2 碘 -淀粉复合物吸收光谱测定
取5.4溶液 2ml（1mg/ml直链淀粉）及 0.09mol·L-1氢氧化钠溶液 3ml加 50ml水稀
释后，再加入 1mol·L-1乙酸溶液 1ml和碘试剂 1ml，用水定容至 100ml，显色 10min，于
分光光度计测定 500-800nm的吸收谱。
A.4.3 碘结合量测定
A.4.3.1 测定
称取重量相当于含 0.1000g淀粉的烘干马铃薯直链淀粉纯品于 100ml容量瓶中，加几滴
无水乙醇湿润后再加入 0.5mol·L-1氢氧化钠溶液 10ml，置沸水浴完全分散，冷却、加水定
容。吸 5ml（含直链淀粉 5mg）分散液放入 200ml烧杯中，加入 85ml水，5ml1mol·L-1盐酸
及5ml0.4mol·L-1碘化钾溶液，按电位滴定装置要求，把烧杯置于电磁搅拌器上，将铂电极
及甘汞电极插入液面下，在电磁搅拌下，用 5mi微量滴定管滴加碘酸钾标准溶液，每次滴加
0.2ml（或 0.1ml），加后 1min读取毫伏数，滴定终点用二次微商法计算。
A 4.3.2 计算
0.6346
直链淀粉碘结合量，% =-------×T×100
m
式中：m——直链淀粉质量，mg；
T——8.34×10-4mol·L-1碘酸钾溶液滴定体积，ml；
0.6346——每毫升 8.34×10-4mol.L-1碘酸钾溶液相当于碘的质量，0.6346mg。
A.4.4 马铃薯直链淀粉纯品标准
马铃薯直链淀粉纯品必须具备：a.λmax为 640-650nm；b 淀粉含量在 85%以上；c 碘结
合量在 19.5以上；d.A0.002%，λmax在 20℃时为340以上。
1cm
附 录 B
水稻、玉米、谷子支链淀粉标准品的选择与制备
（参考件）
B.1 碘 -淀粉复合物吸收光谱测定
取 5.5溶液 5ml（1mg/mL支链淀粉），加 50ml水稀释后，再加入 1mol·L-1乙酸溶液
1ml和碘试剂 1ml，加水至 100ml，显色 10min，用分光光度计测定 400-640nm的吸收谱。
B.2 标准品的选择
水稻、玉米、谷子支链淀粉标准品可以从相应的蜡质谷物品种中选择，标准品必须
分别具备：
水稻：λmax520-530nm，A0.005%， 620nm，在20℃时为17以下；
1cm
玉米：λmax520-530nm，A0.005%， 620nm，在20℃时为25以下；
1cm
谷子：λmax530-540nm，A0.005%， 620nm，在 20℃时为22以下。
1cm
B.3 标准品制备
取适量（10-20g）通过 0.177-0.149mm孔径筛（80-100号）的蜡质谷粉，分别
用甲醇及石油醚在索式脂肪抽提器回流脱脂 16h，放入真空干燥箱烘干（55-56℃）备
用，同时按 GB5006—85测定淀粉含量。
一、玻片标本的制作技术
制作玻片标本对认识生物体的形态结构具有重要意义。玻片标本有临时玻片标本（如涂片、压片、临时装片）和永久玻片标本（如永久装片、切片）。
1．涂片法
涂片法是将材料均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法。
涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织、精巢、花药等。
涂片时应注意：（1）载玻片必须清洁。（2）载玻片要持平。（3）涂层须均匀。涂抹液滴在载玻片中间偏右，用解剖刀刃或牙签等涂匀。（4）涂层要薄。用另一载玻片作推片，沿滴有涂抹液的载玻片面（二载玻片夹角应为30°～45°）由右向左轻轻推动，涂成均匀一薄层。（5）固定。如需固定可用化学固定剂或干燥法（细菌）固定。（6）染色。细菌用亚甲基蓝，血液用瑞氏染液。染色液要盖住全部涂面。（7）冲洗。用吸水纸吸干或烤干。（8）封片。长期保存用加拿大的树胶片片。
2．压片法
压片法是将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散的一种制片方法。
压片法的一般过程：（1）取材。观察细胞分裂，应选取细胞分裂旺盛、新鲜的组织细胞为材料。如根尖、茎尖分生组织、骨髓细胞、花药（花粉母细胞）。精巢（精母细胞）等。（2）固定。材料固定可根据需要而定，取材后立即压片观察，可不作单独固定处理（与染色同步进行）；取材后不立即视察，可将材料用固定液（一般用醋酸酒精固定液）固定。固定2～24小时（因材料而异）后用95％乙醇清洗，保存于70％乙醇中，备用。（3）离析。对细胞不易散开材料用水解分离液（如1N HCl或盐酸一酒精液）处理，一般处理6～20min，解离后经水漂洗后方能染色。（4）染色。染色剂种类很多。观察染色体常用醋酸洋红染色液染色。（5）压片。将材料放在载玻片上，加一滴清水或染液，盖上盖玻片用拇指轻轻压片。（6）观察。压片后，即可在显微镜下观察。
3．装片法
装片法是将生物材料采取整体封固制成玻片标本的方法，用此法可制成临时或永久装片。
装片材料有：微小生物如衣藻、水绵、变形虫、水螅，植物的叶表皮；昆虫的翅、足、口器，人的口腔上皮细胞等。
装片法制作时应注意：（1）手持载玻片时，应注意持平，或放在平台上。滴水时水量要适当，以恰好被盖玻片盖满为度。（2）应将材料用解剖针或镊子展开不使重叠，展平在同一平面上。（3）放盖玻片时，从一侧慢慢盖在水滴上，防止出现气泡。（4）染色时，将一滴染色液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从另一侧吸引，使盖玻片下的标本均匀着色。着色后，用同样的方法，滴一滴清水，把染色液吸出后，在显微镜下观察。
二、显微镜基本实验技术
1．低倍镜（4X、10X）的使用方法
显微镜操作主要包括两个方面：（1）光度调节。正确对光是能否成功地观察到物象的首要条件。对光时，先把聚光器上提，打开可变阑，转动反光镜，这时一边看镜内视野，一边调节聚光器螺旋，直至视野内得到均匀而明亮的光线。（2）焦距的调节。调焦时，先把观察的切片，用推进器对正通光孔中央。然后分两步调焦。先用粗调器定焦，用左眼看目镜，使粗调器慢慢上升，直到能清楚地看到标本为止。随后调节细调器，使镜筒微微升降，至物象更清晰为止。
2．高倍镜（40X）的使用方法
（1）将在低倍镜中找到的物象欲放大部分移到视野中央。（2）转动物镜转换器，使40X物镜对准通光孔，转动时从侧面注视物镜，以防镜头紧压玻片。（3）调节细调螺旋，使物象清晰。
3．油镜（100X）的使用方法
（l）先用低倍镜找到欲观察细微结构，将其结构移至视野中央换高倍镜。（2）下降镜台，在玻片标本上滴一滴香柏油，转换油镜。从侧面注视油镜，把镜台上升，使油镜头浸在香柏油滴中。（3）转动细调螺旋，使物象清晰，进行观察。（4）观察完毕，用镜头纸擦去油镜头和玻片上的香柏油，再用少许二甲苯或乙醚 / 无水乙醇把镜头擦干净。
4．安装指针的简易方法
将目镜的上盖（一片透镜）旋下，剪取一小段头发（其长度约等于目镜的半径），用镊子夹住一端，将另一端蘸少许中性胶，将其粘在目镜内壁的金属光栏（一铁圈）上。稍干后，旋紧上盖，即可使用。
三、单细胞的计数方法
在细菌培养和体外细胞培养，以及环境监测血液检查中常常需要统计细菌、细胞、单细胞藻类、原生动物、血细胞、花粉等数量。细胞计数方法的原理是把一定体积的细胞液体，在显微镜下直接计算其个数，利用所得结果推算出每毫升水体中的单细胞数。具体方法如下：
1．水滴计数法
用管口圆而平滑、大小适宜的吸管，吸取1mL水，然后测定这一吸管1rnL水可滴出多少滴水（反复测定，直到准确为止）。这样可以计算出该吸管滴出的每一滴水的体积。用吸管取样时，如果单细胞是活动的要用碘杀死后，再计数；如果样品浓度太大，计数困难，按倍数稀释到适宜的浓度；另外，取样前必须搅拌，搅拌后，立即取样。取样后，在显微镜下计数，得到一滴水中细胞数的平均值后，可依下列公式求出1mL水体中所含细胞的数目。
1mL水体中含细胞数＝计数平均值×定量吸管每毫升的滴数×稀释倍数
2．血球计数板计数法
血球计数板是由一块厚玻片特制而成，其中央有两个计数室。每个计数室划分出9个大方格（见下图），每格面积1mm2，加盖玻片后的深度为0.1mm。因此，每大方格容积为0.1mm。另外，中央大方格以双线等分为25个中方格。每个中方格又分16个小方格，供细胞计数用。
